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**荧光标记技术
**荧光技术是利用物质吸收光能后,产生激发态而发光的特性。将具有这种特性的荧光素(异硫氰荧光黄或罗丹明
B200)
用化学方法结合在特异的抗体或抗原上,又不损害其抗体或抗原活性的一种荧光显微镜下的示踪技术。抗体与抗原的结合是高度特异的,所以只要知道其中的一种因子,也就知道了另一种因子。
**荧光技术就是利用上述两种特性,把不可见的抗原抗体的反应(一抗)与被荧光素标记的抗体(抗抗体)反应,变为肉眼可见的荧光,在荧光显微镜下我们所能见到的亮绿荧光,不是标本本身发出的,而是荧光物质受到激发后而发出的亮绿色荧光。
**荧光技术利用了物理、化学、组织学、细胞学、生物学等综合性技术,可以检查多种抗原抗体复合物,只要知道一种抗体或抗原,就可以知道其对应的抗原或抗体。
三、**荧光抗体技术可分为直接法、间接法和补体法三种类型。直接法只有抗原、抗体两个因子直接参与反应,利用荧光标记的特异性抗体与相应的抗原结合,以此来鉴定未知抗原,此方法的优点是简单快速,特异性高,非特异性反应少。但一种荧光标记抗体只能针对一种抗原,敏感性较差和不能检查未知抗体。间接法是利用荧光标记抗**球蛋白抗体(抗抗体),鉴定未知抗原或抗体。补体法是利用荧光标记抗补体抗体,以鉴定未知抗原或抗体,是补体结合反应的原理。此方法只需要一种荧光标记抗补体抗体,就可以检查所有种系的抗原抗体系统。因为补体可被任何哺乳类的抗体抗原系统所固定,并与间接法有同样的优点。但是这种方法中的补体不稳定,荧光标记抗补体抗体不能与之固定的补体结合,使试验失败,而且非特异性荧光也比较强。
荧光抗体技术已广泛应用于医学和生物学的很多方面,在临床**学中主要用于在**诊断、寄生虫学诊断、病毒学诊断、**病理方面的诊断、血液中
B
及
T
细胞的鉴定、**和酶的局部组织定位、一些器官移植抗原鉴定、组织中**球蛋及补体组分的检测及自身**病等方面。
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